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胰酶貼壁細胞的消化

更新時間:2016-06-23 點擊次數(shù):1377
     胰酶是自豬胰中提取的多種酶的混合物,主要為胰蛋白酶、胰淀粉酶與胰脂肪酶。按干燥品計算,每1g中含胰蛋白酶不得少于1800活力單位,胰淀粉酶不得少于21000活力單位,胰脂肪酶不得少于12000活力單位。必要時可用蔗糖或低倍胰酶稀釋。
    胰酶是胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的混合物。在中性或弱堿性條件下活性較強,胰蛋白酶能使蛋白質轉化為蛋白胨,胰淀粉酶能使淀粉轉化為糖,胰脂肪酶則能使脂肪分解為甘油及脂肪酸,從而促進消化、增進食欲。主要用于消化不良,食欲不振及肝、胰腺疾病引起的消化障礙,同時也適用于先天性胰功能不全、腹部手術和外傷胰腺切除導致的胰功能不全。或未經手術切除后天引起的胰功能不全及酒精中毒引起的慢性胰腺炎等。
    胰酶使用注意:
    1、在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
    2、胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
   

胰酶貼壁細胞的消化:

    1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清
    2、加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘(不同的細胞消化時間有所不同)
    3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。
    4、此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。

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